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靶向代谢物分析


 方法介绍:


       靶向代谢物分析主要用于分析样品中已知代谢物的含量,如分析血液、细胞和其他生物样本中内源代谢物的含量,人或动物体内药物及其代谢物的组成及含量。在进行靶向分析时,通常使用固相萃取和液液萃取等技术对目标物质进行选择性提取与富集,排除干扰物质,以提高检测的灵敏度和特异性。使用液相色谱对经过提取和净化处理的样品进行分离,进一步排除样品基质对待测物质检测的干扰,最后使用质谱对其进行检测。在进行质谱分析时,通常使用串联四极杆质谱仪在MRM模式下对待测物质离子进行选择性检测。分析已知浓度的标准品,建立工作曲线,然后分析样品中目标物质的质谱信号强度,将其带入工作曲线,可以对样品中待测物质的含量进行绝对定量分析。 串联四极杆质谱仪在MRM模式下,具有极高的检测灵敏度和特异性,生物质谱中心现有的TSQ Altis串联四极杆质谱仪的检测灵敏度可以达到0.01 ppb(千亿分之一),可以对样品中极微量的代谢物进行定量分析。中心即将引进的SCEIX 7500串联四极杆质谱仪的检测灵敏度将在TSQ质谱仪的基础上再提高一到两个数量级。 


送样需求:


       为确保实验结果的准确性,体液(血清、血浆、脑脊液、淋巴液、尿液、唾液、透析液等)样品的建议取样量为100~200 μL,细胞建议提供5×106~1×107个,动物组织建议提供30~200 mg,植物组织建议提供100 mg~1 g,微生物建议提供1×107~1×108个。请尽可能提供详细的参考文献或其他来源的测定方法,以便质谱中心建立样品分析方法。 请尽可能提供详细的被测物及其测定方法信息,包括但不仅限于目标化合物名称、CAS号、结构式、文献或其他来源的测定方法等。 请尽可能提供被测物的标准品,如需质谱中心协助购买标准品,请耐心等待货期。


 实验流程: 


       用户提供血液、组织、细胞和体液样品,加入提取液(80%-100%甲醇或乙腈)后,均质匀浆、超声或振荡提取其中的代谢物。取上清离心后,根据实验目的可以直接对提取液(或其稀释液)进行质谱分析,也可以将提取液浓缩后进行分析,或者使用固相萃取小柱(SPE)对样品进行净化后,再使用质谱进行分析。 



结果输出:


      使用内标法或者外标法和质谱仪自带的定量数据分析软件对待测物质的含量进行定量分析,得到待测物在样品中的绝对含量。质谱中心会将实验结果以电子邮件形式发送到用户的注册邮箱中,实验原始数据保存在计算中心数据存储服务器上,用户可以按需下载。

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