非靶向代谢组分析 

方法介绍

      非靶向代谢组分析利用现代质谱仪高质量分辨率、高质量精度和高扫描速度的性能特点，对血液、组织、细胞和体液等样品中的小分子代谢物质进行大规模的分析、鉴定和定量。非靶向代谢组分析的终极目标是检测生物样本中全部的代谢物，由于代谢物的物理化学性质各异，在样品前处理时通常采用通用型较强的提取方法（如：加入80-100%的甲醇提取液），以便尽可能多地提取不同种类的代谢物。由于生物样品成分复杂，在进行质谱分析前，通常要使用液相色谱对待测样品进行分离，以降低进入质谱仪样品的复杂程度。在进行质谱分析时，通常使用高分辨质谱仪检测进入质谱仪的全部离子的质谱信号，然后使用XCMS、Progenesis QI等数据分析软件对质谱采集的数据进行分析，并对差异代谢物进行鉴定。使用非靶向代谢组学技术可以全面地比较不同生理状态下生物体内代谢物的变化情况、研究疾病的发病机制和药物的治疗机制。 

送样要求：

       为确保实验结果的准确性，体液（血清、血浆、脑脊液、淋巴液、尿液、唾液、透析液等）样品的建议取样量为100~200 μL，细胞建议提供5×106~1×107个，动物组织建议提供30~200 mg，植物组织建议提供100 mg~1 g，微生物建议提供1×107~1×108个。请尽可能提供详细的参考文献或其他来源的测定方法，以便质谱中心建立样品分析方法。 

实验流程： 

       用户提供血液、组织、细胞和体液样品，加入提取液（80%-100%甲醇或乙腈）后，均质匀浆、超声或振荡提取其中的代谢物。取上清离心后，根据实验目的可以直接对提取液（或其稀释液）进行质谱分析，也可以将提取液浓缩后进行分析，或者使用固相萃取小柱（SPE）对样品进行净化后，再进行质谱分析。

实验结果： 

       使用Compound Discoverer、TraceFinder、XCMS、Progenesis QI和Xcalibur等数据分析软件对质谱数据进行多维度分析。获得样品特征质谱峰列表，对其进行统计分析，并对表达有显著性差异的代谢物进行鉴定。实验结果以电子邮件形式发送到用户的注册邮箱中，实验原始数据保存在计算中心数据存储服务器上，用户可以按需下载。